纽约讯——普林斯顿大学的研究团队近日在结核病诊断领域取得重大进展，他们开发出一种基于革命性基因编辑技术CRISPR的新型检测方法。该检测试剂盒设计精简，对实验室基础设施要求极低，有望为资源匮乏地区的结核病筛查提供强大工具。这项研究成果已于上周发表在权威期刊《科学进展》(Science Advances)上。研究人员将其命名为SHINE-TB检测法。在针对13份痰液样本的初步验证中，该检测展现出100%的灵敏度（无漏检）和100%的特异性（无误诊），结果精准可靠。当前市场上虽有多种结核病检测方法，但它们往往难以在资源有限的环境中普及：- 技术要求高：痰涂片镜检法需要专业操作人员，且其敏感性和特异性有限。
尽管其他团队也尝试将CRISPR与等温扩增技术结合用于结核诊断，但普林斯顿团队指出，以往的方法在样本预扩增和最终检测之间仍需“人工操作和专门仪器”，这不仅增加了部署难度，也引入了污染风险。因此，市场亟需一种能在受限环境中运行、样本处理简单、且无需专业设备的CRISPR检测方法。SHINE-TB正是为此而生。SHINE-TB检测基于团队先前开发的通用诊断平台“SHINE”（流线化感染高亮导航流行病系统）。其核心创新在于采用了**两个平行的“一管式”反应**：1. 结核菌检测反应 (Cas13a)：利用重组酶聚合酶扩增(RPA)进行等温扩增，无需热循环仪。扩增后通过体外转录将DNA目标转化为RNA，再由CRISPR相关酶Cas13a进行检测。Cas13a通过向导RNA精准识别结核分枝杆菌基因组中的两个保守区域。一旦结合目标，Cas13a会激活并切割报告分子中的单链RNA，从而释放出可检测的荧光信号（阳性信号）。2. 内参控制反应 (Cas12a)：同时检测样本中的人类DNA。由于痰液样本粘稠且结核菌核酸提取困难，加入此内参至关重要，能有效防止因样本质量问题导致的假阴性结果。设备要求低：研究中使用了基础酶标仪读取结果，但团队已成功验证其与侧向层析试纸条技术兼容，未来可完全摆脱仪器依赖，实现肉眼判读。操作简便：采用“一管式”设计，将扩增与检测步骤整合，最大限度减少了移液操作和人工干预时间。稳定性强：检测试剂可进行冻干(lyophilization)处理，无需冷链储存，保质期超过一天，大大提升了在恶劣条件下的适用性。特异性高：研究证实，该检测对多种其他细菌或真菌分离株无交叉反应。灵敏度佳：对结核分枝杆菌H37Rv菌株的检测限为69.0 CFU/mL，对卡介苗(BCG)的检测限为80.5 CFU/mL。研究第一作者、普林斯顿大学博士生亚历山德拉·贝尔(Alexandra Bell)坦言，当前检测主要针对肺结核，依赖痰液样本。然而，获取足量痰液有时存在困难，尤其对于儿童患者。因此，团队正在积极探索使用更易获取的样本类型，如唾液或血液。为确保研究的可靠性，普林斯顿团队与罗格斯大学(Rutgers University)的研究者合作，后者提供了一种简化结核样本核酸提取的方法。他们还与哥伦比亚一家非营利组织合作，获取了已通过GeneXpert MTB/RIF Ultra检测（分子金标准）和液体培养（微生物学金标准）验证过的临床样本。研究团队已就SHINE-TB检测技术提交了专利申请，目前正在审核中。贝尔透露，下一步的研究方向包括：添加双重病原体检测功能：同时检测结核和其他重要病原体。拓展样本类型应用：优化对唾液、血液等样本的检测性能。整合耐药性检测：类似于赛沛的Xpert检测，未来版本有望同时检测结核菌及其对利福平等关键药物的耐药性，这对于指导精准治疗至关重要。SHINE-TB检测技术的出现，为终结结核病这一古老传染病的努力注入了新的科技力量。其核心价值在于将尖端的CRISPR诊断能力，成功转化为了适用于全球最需要地区的、真正“接地气”的解决方案。随着后续开发的推进和更大规模临床验证的开展，这项便携、快速、精准的检测技术，有望显著改善资源匮乏地区的结核病诊断可及性，助力实现“早发现、早治疗”的目标，最终挽救更多生命。声明：本微信注明来源的稿件均为转载，仅用于分享，不代表平台立场，如涉及版权等问题，请尽快联系我们，我们第一时间更正，谢谢！
